正交驗證 Orthogonal validation

抗體染色通過非抗體的方式進行驗證，例如與RNA表現(xiàn)量相比較。

A. 使用 anti-RAB27A （HPA001333） 抗體分別對胃及骨骼肌組織進行IHC染色，再將染色結(jié)果與相同組織的RNAseq （TPM）表現(xiàn)結(jié)果進行比對

B. 使用Anti-RAB27A抗體分別對人類細胞株SK-MEL-30及Caco-2進行WB試驗，并將結(jié)果與同細胞株的RNAseq （TPM）結(jié)果進行比對。 內(nèi)參對照抗體： Anti-HSP90B1。

獨立抗體驗證Independent antibody validation

使用兩種以上辨識不同抗原表位的抗體，比較目標蛋白在相同組織中的表現(xiàn)情形

A. 使用 Anti-AAMDC （HPA037918）分別對人類腎上腺、肝、淋巴結(jié)及睪丸組織進行IHC染色。

B. 在相同組織中，染色結(jié)果與辨識不同抗原表位的Anti-AAMDC （HPA037919）呈現(xiàn)相似的蛋白分布。

重組蛋白表現(xiàn)驗證Recombinant expression validation

將目標蛋白大量表現(xiàn)于細胞中，以抗體偵測蛋白表現(xiàn)量是否增加

C. 利用西方墨點法測試HEK293T細胞裂解液中的AAMDC蛋白質(zhì)表現(xiàn)，使用Anti-AAMDC （HPA037918）抗體分析。 實驗組為AADMA表現(xiàn)載體 （C-terminal myc-DDK tag~3.1 kD）轉(zhuǎn)染至HEK293T細胞中大量表現(xiàn); 對照組為轉(zhuǎn)染空白載體。