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【樣本特性】
1、樣本應充分離心,不得有溶血及顆粒。
2、標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能立即試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融。
3、樣本不能含疊氮鈉(NaN3),因為疊氮鈉(NaN3)是過氧化物酶(HRP)的抑制劑。
ELISA的基本原理是:
①測定時將受檢標本(抗體或抗原)和酶標抗原(或抗體)按不同步驟與固相載體表面的抗原或抗體進行反應,再用洗滌方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與其它物質(zhì)分開,zui后結合在固相載體上的酶量與標本中受檢的抗體或抗原量成一定比例;再加入酶反應底物后,底物被酶催化后變?yōu)橛猩a(chǎn)物,根據(jù)其顏色反應的深淺進行定性或定量分析,以了解被測標本中抗體或抗原含量。
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②使抗原(或抗體)與某種酶聯(lián)結成酶標抗原(或抗體),而且此酶標抗原(或抗體)既保留其免疫活性,又保留其酶活性;
③ 使抗原(或抗體)結合到某種固相載體表面,并保持其免疫活性;
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