本試劑盒采用**雙抗體夾心酶聯免疫吸附法（Sandwich ELISA）**定量檢測人血清、血漿或尿液中的胱抑素C（Cystatin C）濃度。
包被抗體：微孔板預包被抗人Cystatin C單克隆抗體。
捕獲與檢測：
樣本中的Cystatin C與包被抗體結合。
加入生物素標記的檢測抗體，形成“抗體-抗原-抗體”復合物。
加入鏈霉親和素-HRP（Streptavidin-HRP）結合生物素。
顯色反應：加入TMB底物后，HRP催化顯色（藍色），終止后變?yōu)辄S色，在450 nm處測定吸光度（OD值），OD值與Cystatin C濃度成正比。
樣本類型：人血清、血漿（EDTA/肝素抗凝）、尿液（需離心去除沉淀）。
應用領域：
腎功能評估：Cystatin C是腎小球濾過率（eGFR）的敏感標志物。
心血管疾病風險預測：與動脈粥樣硬化、心衰相關。
科研：腎臟疾病、衰老或藥物毒性研究。
血清/血漿：靜脈采血后離心（3000 rpm，10 min），避免溶血或脂血。
尿液：晨尿或隨機尿，離心（2000 rpm，5 min）后取上清。
儲存：
短期（≤7天）：2-8°C。
長期：-20°C凍存（避免反復凍融）。
試劑準備：
洗滌液：1×PBS-T（1:20稀釋濃縮液）。
標準品/樣本恢復至室溫（20-25°C）。
加樣與孵育：
每孔加入100 μL標準品/樣本，37°C孵育90分鐘。
洗滌3次。
加入100 μL生物素檢測抗體，37°C孵育60分鐘。
加入100 μL SA-HRP，37°C孵育30分鐘。
洗滌5次。
顯色與終止：
加入100 μL TMB底物，避光室溫反應15分鐘。
加入50 μL終止液，立即測定450 nm OD值。
標準曲線：
以標準品濃度（ng/mL）為橫坐標，OD???為縱坐標，擬合4參數邏輯曲線（4PL）。
樣本計算：
根據曲線方程計算濃度，尿液樣本建議用肌酐校正（μg/g Cr）。
避免污染：更換吸頭，避免交叉污染。
干擾因素：
高血脂或溶血樣本需預處理。
類風濕因子（RF）可能引起假陽性。
質量控制：
每板需包含空白孔、標準曲線和質控品。
復孔CV應＜10%。
未開封試劑盒：2-8°C保存，有效期12個月。
開封后：
微孔板：密封后2-8°C保存，1個月內使用。
標準品：-20°C分裝保存。
不與動物Cystatin C交叉反應：僅檢測人源樣本。
高濃度樣本：需稀釋后復測。
對比方法：結果可能與免疫比濁法或質譜法存在差異。
注：具體操作請以實際試劑盒說明書為準。
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