人抗著絲點抗體(ACA/CENP)ELISA Kit

人抗著絲點抗體(ACA/CENP)ELISA Kit

● 試劑盒操作步驟如下： ● 1.用TBS或PBS制備蛋白樣品的稀釋液。稀釋度要取決于樣品中存在的抗原濃度。由于抗原濃度通常未知，因此有必要檢測寬范圍的稀釋度。 2.制備硝酸纖維素膜，用鉛筆標上每個待測一抗/二抗的濃度。所需轉印膜的數(shù)量取決于待篩查的一抗和/或二抗有多少種不同的稀釋濃度。通常來說，一抗要檢測一到兩個稀釋度，而二抗要檢測兩到三個稀釋度。 3.將硝酸纖維素膜放在濾紙上,將抗原稀釋液點在膜上。每個點的體積越少越好(1-5μl)，以保證點盡可能地小。如果需要使用5μl以上的樣品，在點完一次后,干燥2-5分鐘,再點一次。讓膜干燥10-15分鐘，或直至無可見水分。 4.用封閉液封閉膜上的非特異性位點，室溫震蕩孵育1h。 5.用包含1/10體積封閉液的洗滌液稀釋一抗，并加到膜上，室溫震蕩孵育1h。 6.用洗滌液洗膜4次，每次5分鐘，用盡可能大體積的洗脫液。 7.用包含1/10體積封閉液的洗滌液稀釋二抗，并加到膜上，室溫震蕩孵育1h。 8.用洗滌液洗膜4次，每次5分鐘，用盡可能大體積的洗脫液。 9.準備底物工作液。白介素1ELISA試劑盒廠家制備足夠體積的工作液,以確保印跡點完全濕潤,且印跡點在孵育過程中不會干。 10.將膜放在底物工作液中孵育5分鐘。 11.將膜取出,放在塑料布或其它防護膜上。 12.蛋白一側朝上,將印跡貼到膠片上,曝光30-60秒。為獲得*結果,曝光時間可能不同。如果*次曝光不夠,再試試2-5分鐘。 13.在一張優(yōu)化好的印跡膜上,底物產生的信號可能會持續(xù)6-24小時,這取決于具體的產品。

編輯：小檀20190203