|
ATCC
|
|
ATCC HTB-132(MDA-MB-468細胞), MDA-MB-468, 人乳腺癌細胞
|
|
R Cailleau
|
|
人
|
|
**，乳腺
|
|
乳腺癌
|
|
上皮細胞樣
|
|
貼壁生長
|
|
L-15培養(yǎng)基(GIBCO,貨號41300039)，90%；FBS，10%。
|
|
HTB-132
|
|
氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%; 溫度：37 ℃,
|
|
1：2至1：6，每周2次。
|
|
90% 完全培養(yǎng)基+10% DMSO，液氮儲存
|
|
陰性
|
|
1
|
|
該細胞可以作為轉(zhuǎn)染宿主細胞。
|
Amelogenin: X
CSF1PO: 12
D13S317: 12
D16S539: 9
D5S818: 12
D7S820: 8
THO1: 7
TPOX: 8,9
vWA: 18
|
AK-1, 1
ES-D, 1
G6PD, A
GLO-I, 1-2
Me-2, 1-2
PGM1, 1
PGM3, 2
|
Brinkley BR, et al. Variations in cell form and cytoskeleton in human breast carcinoma cells in vitro. Cancer Res. 40: 3118-3129, 1980. PubMed: 7000337
Siciliano MJ, et al. Mutually exclusive genetic signatures of human breast tumor cell lines with a common chromosomal marker. Cancer Res. 39: 919-922, 1979. PubMed: 427779
Pathak S, et al. A human breast adenocarcinoma with chromosome and isoenzyme markers similar to those of the HeLa line. J. Natl. Cancer Inst. 62: 263-271, 1979. PubMed: 283262
Cailleau R, et al. Long-term human breast carcinoma cell lines of metastatic origin: preliminary characterization. In Vitro 14: 911-915, 1978. PubMed: 730202
Nigro JM, et al. Mutations in the p53 gene occur in diverse human tumour types. Nature 342: 705-707, 1989. PubMed: 2531845
Bates SE, et al. Expression of the transforming growth factor-alpha/epidermal growth factor receptor pathway in normal human breast epithelial cells. Endocrinology 126: 596-607, 1990. PubMed: 2294006
Avila MA, et al. Quercetin mediates the down-regulation of mutant p53 in the human breast cancer cell line MDA-MB468. Cancer Res. 54: 2424-2428, 1994. PubMed: 8162591
|
MDA-MB-468細胞人乳腺癌細胞特點和簡介
1977年由R. Cailleau等從一位患有乳腺癌的51歲黑人女性轉(zhuǎn)移癌胸水中分離得到。雖然供組織者的G6PD等位基因雜合，但此細胞株始終表現(xiàn)為G6PD A表型。 在本庫通過支原體檢測。 在本庫通過STR檢測。
MDA-MB-468細胞人乳腺癌細胞接受后處理
1) 收到細胞后，請檢查是否漏液 ，如果漏液，請拍照片發(fā)給我們。
2) 請先在顯微鏡下確認細胞生長 狀態(tài)，去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3) 棄去T25瓶中的培養(yǎng)基，添加 6ml本公司附帶的完全培養(yǎng)基。
4) 如果細胞密度達80%-90%請及 時進行細胞傳代，傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的完全培養(yǎng)基。
5) 接到細胞次日，請檢查細胞是 否污染，若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染，請及時與我們?nèi)〉寐?lián)系。
MDA-MB-468細胞人乳腺癌細胞培養(yǎng)操作
1）復(fù)蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。**天換液并 檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。 1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞，根據(jù)細胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液，注意凍 存管做好標(biāo)識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
MDA-MB-468細胞人乳腺癌細胞培養(yǎng)注意事項
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn) 象發(fā)生請及 時和我們聯(lián)系。
2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關(guān)信息，如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所 需細胞因子 等，確保細胞培養(yǎng)條件一致。若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細胞出現(xiàn)問 題，責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。
3. 用 75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題貼壁細胞會有少量 從瓶 壁脫落，將細胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng) 4~6 小時,再取出觀察。此時多數(shù)細胞均 會貼壁，若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍 染色測定細胞活力，如果證實細胞活力正常， 請將細胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng)；如果染色結(jié)果顯示細胞無活 力，請拍下 照片及時和我們聯(lián)系，信息確認后我們?yōu)槟倜赓M寄送一次。
4. 靜置細胞貼壁后，請將細胞瓶內(nèi)的培養(yǎng)基倒出，留 6~8mL 維持細胞正常培養(yǎng)，待細 胞匯 合度 80%左右時正常傳代。
5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶內(nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用，細胞 傳代時可以 一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合，使細胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。
6. 建議客戶收到細胞后前 3 天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和 Procell 技術(shù) 部 溝通交流。由于運輸?shù)脑?，個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián) 系，告知細胞的具體情況，以便我們 的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。
7.該細胞僅供科研使用。
