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ATCC
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ATCC CCL-243(K-562), K-562, 人慢性髓原白血病細胞
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HT Holden
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人
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骨髓
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慢性骨髓性白血病(CML)
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淋巴母細胞樣
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懸浮生長
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IMDM培養(yǎng)基(GIBCO,貨號12200036)，90%；FBS，10%。
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CCL-243
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氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%; 溫度：37 ℃,
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1：2至1：6，每周2次。
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90% 完全培養(yǎng)基+10% DMSO，液氮儲存
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陰性
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1
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該細胞可以作為轉(zhuǎn)染宿主細胞。
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Amelogenin: X
CSF1PO: 9,10
D13S317: 8
D16S539: 11,12
D5S818: 11,12
D7S820: 9,11
THO1: 9.3
TPOX: 8,9
vWA: 16
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AK-1, 1
ES-D, 1
G6PD, B
GLO-I, 2
Me-2, 0
PGM1, 0
PGM3, 1
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Nucleotide (GenBank) : X96391 H.sapiens mRNA for alternatively spliced isoform of CLC-6 chloride channel.
Nucleotide (GenBank) : AF146430 Homo sapiens cell-line K562 sodium/hydrogen exchanger isoform 1 mRNA, complete cds.
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Koeffler HP, Golde DW. Human myeloid leukemia cell lines: a review. Blood 56: 344-350, 1980. PubMed: 6996765
Ortaldo JR, et al. Specificity of natural cytotoxic reactivity of normal human lymphocytes against a myeloid leukemia cell line. J. Natl. Cancer Inst. 59: 77-82, 1977. PubMed: 69036
Lozzio CB, Lozzio BB. Human chronic myelogenous leukemia cell-line with positive Philadelphia chromosome. Blood 45: 321-334, 1975. PubMed: 163658
Lozzio BB, Lozzio CB. Properties and usefulness of the original K-562 human myelogenous leukemia cell line. Leuk. Res. 3: 363-370, 1979. PubMed: 95026
Andersson LC, et al. K562--a human erythroleukemic cell line. Int. J. Cancer 23: 143-147, 1979. PubMed: 367973
Lozzio BB, et al. A multipotential leukemia cell line (K-562) of human origin. Proc. Soc. Exp. Biol. Med. 166: 546-550, 1981. PubMed: 7194480
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ATCC CCL-243(K-562)人慢性髓原白血病細胞特點和簡介
連續(xù)細胞株K-562由Lozzio從一位臨終的53歲女性慢性骨髓性白血病患者的胸水中建立。 細胞被歸入高度未分化的粒性白細胞類。 Anderson等對其表面膜性質(zhì)的研究表明，K-562是一株人類紅白血病細胞。 K-562細胞株在自然殺傷分析中廣泛作為高敏感的體外受體。 See Pross等將它用于NK細胞的體外詳細檢測，包括NK細胞活性的數(shù)學(xué)量化。 K-562母細胞是多能性，造血惡性細胞，它能自發(fā)分化成可識別的紅血球祖細胞、粒性白細胞、單核細胞等。它是EBNA陰性的。 在本庫通過支原體檢測。 在本庫通過STR檢測。
ATCC CCL-243(K-562)人慢性髓原白血病細胞接受后處理
1) 收到細胞后，請檢查是否漏液 ，如果漏液，請拍照片發(fā)給我們。
2) 請先在顯微鏡下確認細胞生長 狀態(tài)，去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3) 棄去T25瓶中的培養(yǎng)基，添加 6ml本公司附帶的完全培養(yǎng)基。
4) 如果細胞密度達80%-90%請及 時進行細胞傳代，傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的完全培養(yǎng)基。
5) 接到細胞次日，請檢查細胞是 否污染，若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染，請及時與我們?nèi)〉寐?lián)系。
ATCC CCL-243(K-562)人慢性髓原白血病細胞培養(yǎng)操作
1）復(fù)蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。**天換液并 檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞，根據(jù)細胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液，注意凍 存管做好標(biāo)識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
ATCC CCL-243(K-562)人慢性髓原白血病細胞培養(yǎng)注意事項
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn) 象發(fā)生請及 時和我們聯(lián)系。
2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關(guān)信息，如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所 需細胞因子 等，確保細胞培養(yǎng)條件一致。若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細胞出現(xiàn)問 題，責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。
3. 用 75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題貼壁細胞會有少量 從瓶 壁脫落，將細胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng) 4~6 小時,再取出觀察。此時多數(shù)細胞均 會貼壁，若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍 染色測定細胞活力，如果證實細胞活力正常， 請將細胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng)；如果染色結(jié)果顯示細胞無活 力，請拍下 照片及時和我們聯(lián)系，信息確認后我們?yōu)槟倜赓M寄送一次。
4. 靜置細胞貼壁后，請將細胞瓶內(nèi)的培養(yǎng)基倒出，留 6~8mL 維持細胞正常培養(yǎng)，待細 胞匯 合度 80%左右時正常傳代。
5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶內(nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用，細胞 傳代時可以 一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合，使細胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。
6. 建議客戶收到細胞后前 3 天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和 Procell 技術(shù) 部 溝通交流。由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián) 系，告知細胞的具體情況，以便我們 的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。
7.該細胞僅供科研使用。
