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ATCC CCL-2.2(HeLa S3)
品牌:ATCC
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ATCC CCL-2.2(HeLa S3)

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ATCC CCL-2.2(HeLa S3)標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞株基本信息

出品公司: ATCC
細(xì)胞名稱(chēng): ATCC CCL-2.2(HeLa S3), HeLa S3, 人宮頸癌細(xì)胞
存儲(chǔ)人: TT Puck
種屬來(lái)源:
組織來(lái)源: 子宮
疾病特征: 宮頸癌
細(xì)胞形態(tài): 上皮細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性: 貼壁生長(zhǎng)
培養(yǎng)基: F-12K,90%;FBS,10%。
產(chǎn)品目錄號(hào): CCL-2.2
生長(zhǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%; 溫度:37 ℃,
傳代方法: 1:2至1:6,每周2次。
凍存條件: 90% 完全培養(yǎng)基+10% DMSO,液氮儲(chǔ)存
支原體檢測(cè): 陰性
**等級(jí): 2
應(yīng)用: 該細(xì)胞可以作為轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞。
STR:
Amelogenin: X
CSF1PO: 9,10
D13S317: 13.3
D16S539: 9,10
D5S818: 11,12
D7S820: 8,12
THO1: 7
TPOX: 8,12
vWA: 16,18
同工酶:
G6PD, A
備注:
Nucleotide (GenBank) : Y09723 H.sapiens mRNA for Miz-1 protein.
Nucleotide (GenBank) : Y08698 H.sapiens mRNA for RanBP3 (59 kDa).
Nucleotide (GenBank) : Y08699 H.sapiens mRNA for RanBP3, splice variant.
Nucleotide (GenBank) : U25182 Human antioxidant enzyme AOE37-2 mRNA, complete cds.
Nucleotide (GenBank) : U33822 Human tax1-binding protein TXBP181 mRNA, complete cds.
Nucleotide (GenBank) : U43430 Human epsilon isoform 14-3-3 protein mRNA, complete cds.
Nucleotide (GenBank) : Y08697 H.sapiens mRNA for RanBP3 small splice variant (53 kDa).
Nucleotide (GenBank) : L15328 Saccharomyces cerevisiae RNA helicase gene, complete cds.
Nucleotide (GenBank) : U33821 Homo sapiens tax1-binding protein TXBP151 mRNA, complete cds.
Nucleotide (GenBank) : NM_003443 Homo sapiens zinc finger protein 151 (pHZ-67) (ZNF151), mRNA.
Nucleotide (GenBank) : AF034102 Homo sapiens NBMPR-insensitive nucleoside transporter ei (ENT2) mRNA, complete cds.
Nucleotide (GenBank) : NM_006024 Homo sapiens Tax1 (human T-cell leukemia virus type I) binding protein 1 (TAX1BP1), mRNA.
參考文獻(xiàn):
Chen TR. Re-evaluation of HeLa, HeLa S3, and HEp-2 karyotypes. Cytogenet. Cell Genet. 48: 19-24, 1988. PubMed: 3180844
Boshart M, et al. A new type of papillomavirus DNA, its presence in genital cancer biopsies and in cell lines derived from cervical cancer. EMBO J. 3: 1151-1157, 1984. PubMed: 6329740
Puck TT, et al. Clonal growth of mammalian cells in vitro; growth characteristics of colonies from single HeLa cells with and without a feeder layer. J. Exp. Med. 103: 273-283, 1956. PubMed: 13286432
Yee C, et al. Presence and expression of human papillomavirus sequences in human cervical carcinoma cell lines. Am. J. Pathol. 119: 361-366, 1985. PubMed: 2990217
Puck TT, Marcus PI. A rapid method for viable cell titration and clone production with HeLa cells in tissue culture: the use of x-irradiated cells to supply conditioning factors. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 41: 432-437, 1955.

ATCC CCL-2.2(HeLa S3)人宮頸癌細(xì)胞特點(diǎn)和簡(jiǎn)介

該細(xì)胞是1955年由Puck TT, Marcus PI和Cieciura SJ建系的,含HPV-18序列;角蛋白陽(yáng)性;可用于與染色體突變、細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)、集落形成相關(guān)的哺乳動(dòng)物細(xì)胞的克隆分析。

ATCC CCL-2.2(HeLa S3)人宮頸癌細(xì)胞接受后處理

1) 收到細(xì)胞后,請(qǐng)檢查是否漏液 ,如果漏液,請(qǐng)拍照片發(fā)給我們。

2) 請(qǐng)先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長(zhǎng) 狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。

3) 棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加 6ml本公司附帶的完全培養(yǎng)基。

4) 如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%請(qǐng)及 時(shí)進(jìn)行細(xì)胞傳代,傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的完全培養(yǎng)基。

5) 接到細(xì)胞次日,請(qǐng)檢查細(xì)胞是 否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,請(qǐng)及時(shí)與我們?nèi)〉寐?lián)系。

ATCC CCL-2.2(HeLa S3)人宮頸癌細(xì)胞培養(yǎng)操作

1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過(guò)夜)。**天換液并 檢查細(xì)胞密度。

2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類(lèi);

1. 細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,細(xì)胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。

2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細(xì)胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液,注意凍 存管做好標(biāo)識(shí)。

3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

ATCC CCL-2.2(HeLa S3)人宮頸癌細(xì)胞培養(yǎng)注意事項(xiàng)

1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn) 象發(fā)生請(qǐng)及 時(shí)和我們聯(lián)系。

2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū),了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所 需細(xì)胞因子 等,確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致。若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn) 題,責(zé)任由客戶(hù)自行承擔(dān)。

3.   用 75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題貼壁細(xì)胞會(huì)有少量 從瓶 壁脫落,將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng) 4~6 小時(shí),再取出觀察。此時(shí)多數(shù)細(xì)胞均 會(huì)貼壁,若細(xì)胞仍不能貼壁請(qǐng)用臺(tái)盼藍(lán) 染色測(cè)定細(xì)胞活力,如果證實(shí)細(xì)胞活力正常, 請(qǐng)將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng);如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無(wú)活 力,請(qǐng)拍下 照片及時(shí)和我們聯(lián)系,信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M(fèi)寄送一次。

4.   靜置細(xì)胞貼壁后,請(qǐng)將細(xì)胞瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基倒出,留 6~8mL 維持細(xì)胞正常培養(yǎng),待細(xì) 胞匯 合度  80%左右時(shí)正常傳代。

5. 請(qǐng)客戶(hù)用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用,細(xì)胞 傳代時(shí)可以 一定比例和客戶(hù)自備的培養(yǎng)基混合,使細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。

6.   建議客戶(hù)收到細(xì)胞后前 3 天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和 Procell 技術(shù) 部 溝通交流。由于運(yùn)輸?shù)脑?,個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián) 系,告知細(xì)胞的具體情況,以便我們 的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問(wèn)題解決。

7.該細(xì)胞僅供科研使用。


ATCC CCL-2.2(HeLa S3)標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞株說(shuō)明書(shū)pdf版和相關(guān)資料下載

ATCC CCL-2.2(HeLa S3)標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞株應(yīng)用舉例

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