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Immortalized-(Conditionally)-Mouse-Hepatocytes-(ImHep)
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Immortalized-(Conditionally)-Mouse-Hepatocytes-(ImHep)

商品詳情 參考文獻(xiàn) 相關(guān)資料
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BioSafety Level II
Organism H-2Kb-tsA58 transgenic mouse
Source Organ Liver
Growth Properties Adherent
Recommended Seeding Density Recommended split ratio of 1:3
Markers albumin, AFP, transferrin, LPK, CK8 and CK18
Applications For Research Use Only
Immortalization Method Isolated from transgenic mouse carrying a temperature-sensitive simian virus 40 tumor antigen (tsA58)
Description ImHep is a conditionally immortalized mouse hepatocyte isolated from the mouse harboring thermolabile mutation (tsA58) under the control of an interferon (IFN)-γ-inducible H-2Kb promoter and a temperature-sensitive simian virus 40 large T antigen. The functional expression of the SV40 large T antigen is induced by culturing the cells in vitro in medium containing IFN γ at a temperature permissive (33°C). At a non-permissive temperature (37°C-39°C) or when cultured without IFN γ over 3 passages, the cells cease to proliferate. The ImHep cell line is unique in that 1) it is easily transfectable; 2) it is able to persist in vivo post-hepatocllular transplantation at the non-permissive temperature; both of these characteristics make this cell line a valuable tool for in vitro genetic manipulation, and use in mouse models for ex vivo gene therapy.
Procedure Overview
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Propagation Use of PriCoat? T25 Flasks (G299) or Applied Cell Extracellular Matrix (G422) is required for cell adhesion to the culture vessels. Grow cells in ECM-coated culture vessels with the following conditions. The base medium for this cell line is Prigrow II medium available from ABM (TM002). To make the completed growth medium, add the following components to the base medium: 5% fetal bovine serum (TM999), 5 U/ml murine IFN-γ, 1 μg/mL insulin, 10–5 M hydrocortisone and 1% Penicillin/Streptomycin (G255). Atmosphere: air: 95%, CO?: 5%; Temperature: 33.0°C.
Preservation 1. Freeze Medium: Complete growth medium with 20% FBS and 10% DMSO. 2. Storage Temperature: Liquid nitrogen vapour phase.
Quality Control 1) Western Blot and Immunofluorescence were used to detect hepatocyte markers albumin, AFP, transferrin, LPK, CK8 and CK18; 2) Immunofluorescence were used to verify the presence of SV40 large T antigen
Disclaimer 1. The CoA for this product (provided upon request) verifies the cell-type specific gene expression via RT-PCR only. All test parameters provided in the CoA are conducted using abm's standardized culture system and procedures. The stated values may vary under the end-user's culture conditions. Please verify that the product is suitable for your studies by referencing published papers or ordering RNA (0.5 μg, Cat.# C207, $450.00) or cell lysate (100 μg, Cat.# C206, $600.00) to perform preliminary experiments, or alternatively use our Gene Expression Assay Service (Cat# C138). All sales are final.
2. We strongly recommend live cell shipments for ease of cell transfer and this option can be requested at the time of ordering. Please note that the end-user will need to evaluate the feasibility of live cell shipment by taking into account the final destination's temperature variation and its geographical location. In addition, we thoroughly test our cell lines for freeze-thaw recovery. If frozen cells were received and not recovered in your lab under the exact, specified conditions (using recommended culture vessel, media, additional supplements, and atmospheric conditions), a live cell replacement is possible at a cost (plus shipping).
3. All of abm's cell biology products are for research use ONLY and NOT for therapeutic/diagnostic applications. abm is not liable for any repercussions arising from the use of its cell biology product(s) in therapeutic/diagnostic application(s). Please contact a technical service representative for more information.
4. abm makes no warranties or representations as to the accuracy of the information on this site. Citations from literature and provided for informational purposes only. abm does not warrant that such information has been shown to be accurate.
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