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JWA Stable Knockout Human MHCC97L Cell Line
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JWA Stable Knockout Human MHCC97L Cell Line

商品詳情 參考文獻(xiàn) 相關(guān)資料
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BioSafety Level II
Organism Homo sapiens
SourceOrgan Liver
Growth Properties Adherent
Morphology Polygonal
Description JWA Stable Knockout Human MHCC97L Cell Line is established via CRISPR/Cas9 mediated frameshift mutation of the JWA gene (NM_006407) using the following guide RNA sequence: AGAGCAGGTTGCTCACTACG. JWA gene is associated with cytoskeleton and has been reported to regulate intracellular concentrations of taurine and glutamate. As such, this cell line may be useful to study membrane trafficking. This cell line is sequenced verified to be biallelic knockout.
Procedure Overview
Clones 2C-C7
Passage Number P5
Applications For Research Use Only
Propagation Use of PriCoat? T25 Flasks (G299) or Applied Cell Extracellular Matrix (G422) is required for cell adhesion to the culture vessels. Grow cells in ECM-coated culture vessels with the following conditions. The base medium for this cell line is Prigrow III medium available in ABM, Cat. No. TM003. To make the complete growth medium, add the following components to the base medium: fetal bovine serum (TM999) to a final concentration of 10% and Penicillin/Streptomycin(G255). Atmosphere: air, 95%; Carbon dioxide (CO2), 5%. Selection: 1.5 μg/ml Puromycin (G264)
Subculturing 1. Remove and discard culture medium. 2. Add 2.0mL of Trypsin-EDTA(TM050) solution to flask and observe cells under an inverted microscope until cell layer is dispersed. Note: Cells that are difficult to detach may be placed at 37°C to facilitate dispersal. 3. Centrifuge cells at 1500rpm for 3 minutes to pellet. 4. Aspirate out trypsin, leaving pellet undisturbed. 5. Resuspend pellet in fresh culture medium and plate in new culture vessel. 6. Incubate cultures at 37°C.
Preservation 1. Freeze Medium: Complete growth medium with 20% FBS and 10% DMSO. 2. Storage Temperature: Liquid nitrogen vapour phase.
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Quality Control 1) 1.5 μg/ml of puromycin (G264) was used for clonal selection; 2) JWA gene knockout confirmed via surveryor assay and sanger sequencing of targeted genomic region
Disclaimer 1. The CoA for this product (provided upon request) verifies the cell-type specific gene expression via RT-PCR only. All test parameters provided in the CoA are conducted using abm's standardized culture system and procedures. The stated values may vary under the end-user's culture conditions. Please verify that the product is suitable for your studies by referencing published papers. All sales are final.
2. We strongly recommend live cell shipments for ease of cell transfer and this option can be requested at the time of ordering. Please note that the end-user will need to evaluate the feasibility of live cell shipment by taking into account the final destination's temperature variation and its geographical location. In addition, we thoroughly test our cell lines for freeze-thaw recovery. If frozen cells were received and not recovered in your lab under the exact, specified conditions (using recommended culture vessel, media, additional supplements, and atmospheric conditions), a live cell replacement is possible at a cost (plus shipping).
3. All of abm's cell biology products are for research use ONLY and NOT for therapeutic/diagnostic applications. abm is not liable for any repercussions arising from the use of its cell biology product(s) in therapeutic/diagnostic application(s). Please contact a technical service representative for more information.
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