產(chǎn)品概述
我們建議使用本產(chǎn)品的更新版本：MethylFlash Global DNA Methylation （5-mC） ELISA Easy Kit（比色法）
MethylFlash Methylated DNA 5-mC Quantification Kit (Colorimetric)是一整套優(yōu)化的緩沖液和試劑，通過特異性測量類似 ELISA 的微孔板形式的 5-甲基胞嘧啶 （5-mC） 水平，對整體 DNA 甲基化進(jìn)行比色定量。與基于 LUMA 或基于 LINE-1、Alu 和 LTR 的檢測相比，MethylFlash? 技術(shù)可直接定量實際的整體 DNA 甲基化。
該試劑盒還經(jīng)過專門優(yōu)化，可與 MethylFlash 羥甲基化 DNA 定量試劑盒（比色法）配合使用，同時定量甲基化 DNA 和羥甲基化 DNA。
產(chǎn)品特點
MethylFlash? 甲基化 DNA 定量試劑盒（比色法）通過簡化工作流程和提高結(jié)果的一致性，進(jìn)一步改進(jìn)了我們之前的 Methylamp? 整體 DNA 甲基化定量試劑盒。它使用一種創(chuàng)/新方法使背景信號極低，從而消除了板的干燥和阻塞步驟。與基于色譜的方法（如 HPLC 或質(zhì)譜法）相比，該產(chǎn)品提供了一種經(jīng)濟高效的方法來準(zhǔn)確測量 5-甲基胞嘧啶的水平。該套件具有以下優(yōu)點和特點：
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比色分析具有易于遵循的步驟，方便快捷。整個過程可以在 4 小時內(nèi)完成。
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創(chuàng)/新的試劑盒組成使背景信號極低，無需板封閉，使檢測簡單、準(zhǔn)確、可靠且一致。
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高靈敏度，其中檢測限可低至 0.2 ng 的甲基化 DNA，可接受低至 50 ng 的起始基因組 DNA。
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優(yōu)化的抗體和增強劑溶液對 5mC 具有高度特異性，在樣品 DNA 的指定濃度范圍內(nèi)，與未甲基化胞嘧啶沒有交叉反應(yīng)性，與羥甲基胞嘧啶沒有或可以忽略不計的交叉反應(yīng)性。
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包括通用陽性和陰性對照，適用于定量任何物種的甲基化 DNA。
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聯(lián)管孔板規(guī)格使分析更加靈活：手動或高通量分析。
原理和程序
MethylFlash? 甲基化 DNA 定量試劑盒（比色法）包含了定量全球 DNA 甲基化所需的所有試劑。在該檢測中，DNA 結(jié)合到剝離經(jīng)過專門處理的孔中，這些孔具有高 DNA 親和力。使用捕獲和檢測抗體檢測 DNA 的甲基化部分，然后通過在微孔板分光光度計中讀取 450 nm 處的吸光度，通過類似 ELISA 的反應(yīng)進(jìn)行定量。甲基化 DNA 的量與測得的 OD 強度成正比，這可以通過試劑盒中包含的兩種不同 DNA 樣品的相對甲基化狀態(tài)公式或使用標(biāo)準(zhǔn)曲線對 5-甲基胞嘧啶 （5mC） 進(jìn)行**定量來計算。
簡單、快速、靈活
整個比色分析具有易于遵循的步驟，方便快捷，可在 4 小時內(nèi)完成。條孔微孔板規(guī)格允許在手動或高通量分析中進(jìn)行靈活的分析。該試劑盒包含通用陽性和陰性對照，用于定量來自任何物種（如哺乳動物、植物、真菌、細(xì)菌和病毒）的甲基化 DNA。
安/全方便
定量整體 DNA 甲基化所需的所有試劑，包括陰性對照和陽性對照，都方便地包裝在試劑盒中。DNA 樣品的直接比色定量取代了過時或劣質(zhì)的方法，無需 DNA 消化/變性、放射性、提取或色譜分析。
高靈敏度和特異性
新穎的程序和專有的試劑盒組成能夠以高靈敏度和特異性實現(xiàn)甲基化 DNA 的準(zhǔn)確定量。起始 DNA 的檢測限可低至 0.2 ng 的甲基化 DNA。
可用的基于 ELISA 的 Global DNA 甲基化檢測方法的比較
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MethylFlash（比色）
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競爭對手 Z
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競爭對手 C
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檢測原理
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直接 ELISA
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直接 ELISA
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間接 ELISA
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格式
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96 孔板
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96 孔板
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96 孔板
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敏感性
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出色的檢測限：0.2 ng 5-mC DNA
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良好的檢測限：>0.5 ng 的 5-mC DNA
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檢測限極低：>1000 ng 5 mC DNA
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信噪比
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>20，背景非常低
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<4 具有高背景
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不適用*
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程序便利性
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無需 DNA 板封閉和變性
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需要板封閉和 DNA 變性
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需要在另一塊板中進(jìn)行板封閉、DNA 消化和抗體競爭性孵育
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協(xié)議時間
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<4 小時
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<4 小時
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>8 小時
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DNA 類型和種類
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適用于任何物種，包括 ssDNA 和 dsDNA
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**人和小鼠 ssDNA
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各種物種
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特 異性
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僅特定于 5 mC
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與 5-hmC 的交叉反應(yīng)
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不適用*
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定量類型
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相對和**定量
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相對
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相對
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標(biāo)準(zhǔn)控制
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穩(wěn)定，**量為 5 mC 即可定量，可普遍用于任何物種
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不穩(wěn)定，不能定量，只能用于人或小鼠
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不適用*
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*/小輸入量
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50 ng
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100 ng
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1000 ng
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檢測準(zhǔn)確性
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高、穩(wěn)定和定量的標(biāo)準(zhǔn)品控制。經(jīng)用戶驗證與 LC-MS 分析密切相關(guān)
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標(biāo)準(zhǔn)品控制不明確、不穩(wěn)定且未定量
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不適用*
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% 5 mC 計算
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簡單
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復(fù)雜
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未提供
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**方法
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是的
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不
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不
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人氣
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非常高的已發(fā)表引文計數(shù)
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低發(fā)表引文計數(shù)
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低發(fā)表引文計數(shù)
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支持專業(yè)知識
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自 2006 年以來
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自 2013 年以來
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自 2011 年以來
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* 數(shù)據(jù)表提供的信息不足或產(chǎn)品無法提供數(shù)據(jù)以做出*/終決定
