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NIH/3T3細(xì)胞
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NIH/3T3細(xì)胞提示,多數(shù)細(xì)胞系和原代細(xì)胞都會(huì)以一種單層的形式生長(單層細(xì)胞)或者覆蓋在玻璃或經(jīng)處理的塑料物體表面。為了保持細(xì)胞的健康與活躍增殖,通常需要對(duì)細(xì)胞進(jìn)行有規(guī)律的傳代。常見有貼壁細(xì)胞的傳代和懸浮細(xì)胞的傳代。

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NIH/3T3細(xì)胞貼壁細(xì)胞的傳代:對(duì)于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強(qiáng)度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進(jìn)行消化,晃動(dòng)使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,鏡下見細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,輕輕振動(dòng)瓶底使細(xì)胞全部脫落,加入2-3ml完全培養(yǎng)基后,輕輕吹打,使細(xì)胞基本成單個(gè)懸浮,然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi),加入完全培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒?yàn)。


NIH/3T3細(xì)胞來源:美國模式培養(yǎng)物集存庫(American type culture collection)即ATCC。ATCC成立于1925年,是世界上的生物資源中心,由美國14家生化、醫(yī)學(xué)類行業(yè)協(xié) 會(huì)組成的理事會(huì)負(fù)責(zé)管理,是一家全球性、非盈利生物標(biāo)準(zhǔn)品資源中心。ATCC向全球發(fā)布其獲取、鑒定、保存及開發(fā)的生物標(biāo)準(zhǔn)品,推動(dòng)科學(xué)研究的驗(yàn)證,應(yīng)用及進(jìn)步。ATCC菌種|ATCC菌株


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