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293T細(xì)胞
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293T細(xì)胞提示,多數(shù)細(xì)胞系和原代細(xì)胞都會(huì)以一種單層的形式生長(zhǎng)(單層細(xì)胞)或者覆蓋在玻璃或經(jīng)處理的塑料物體表面。為了保持細(xì)胞的健康與活躍增殖,通常需要對(duì)細(xì)胞進(jìn)行有規(guī)律的傳代。常見(jiàn)有貼壁細(xì)胞的傳代和懸浮細(xì)胞的傳代。

293T細(xì)胞貼壁細(xì)胞的傳代:對(duì)于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強(qiáng)度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進(jìn)行消化,晃動(dòng)使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,鏡下見(jiàn)細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,輕輕振動(dòng)瓶底使細(xì)胞全部脫落,加入2-3ml完全培養(yǎng)基后,輕輕吹打,使細(xì)胞基本成單個(gè)懸浮,然后分置其它無(wú)菌培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),加入完全培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒?yàn)。

293T細(xì)胞懸浮細(xì)胞的傳代:一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),加入完全培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入完全培養(yǎng)基,輕輕吹勻后,分置其它培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)加入完全培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。

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