詳細(xì)說(shuō)明：　　

　　R1細(xì)胞小鼠胚胎內(nèi)層細(xì)胞團(tuán)

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　　R1細(xì)胞小鼠胚胎內(nèi)層細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞凍存注意事項(xiàng)：

　　在細(xì)胞凍存時(shí)加入溫保護(hù)劑，能大大提高凍存效果。常用的低溫保護(hù)劑是DMSO，它是一種滲透性保護(hù)劑，可迅速透入細(xì)胞，提高胞膜對(duì)水的通透性，降低冰點(diǎn)，延緩凍結(jié)過(guò)程，能使細(xì)胞內(nèi)水分在凍結(jié)前透出細(xì)胞外，在胞外形成冰晶，減少胞內(nèi)冰晶，從而減少冰晶對(duì)細(xì)胞的損傷。

　　R1細(xì)胞小鼠胚胎內(nèi)層細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞的凍存：

　　1.先將凍存管放入 4℃冰箱，約 40min。

　　2.接著置于-20℃冰箱，約30-60min。

　　3.置于-80 *低溫冰箱中放置過(guò)夜。

　　4.置于液氮罐中長(zhǎng)期保存。

　　5 同時(shí)做好凍存記錄，在自己的筆記本和凍存記錄本上均要記錄。

　　R1細(xì)胞小鼠胚胎內(nèi)層細(xì)胞團(tuán)的復(fù)蘇: 應(yīng)遵守慢凍快融的原則。

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　　R1細(xì)胞小鼠胚胎內(nèi)層細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞凍存和復(fù)蘇實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):

　　1. 從增殖期到形成致密的單層細(xì)胞以前的培養(yǎng)細(xì)胞都可以用于凍存，但*好為對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞。在凍存前***好換一次培養(yǎng)液。

　　2. 將凍存管放入液氮容器或從中取出時(shí)，要做好防護(hù)工作，以免**。

　　3. 凍存和復(fù)蘇*好用新配制的培養(yǎng)液。

　　細(xì)胞凍存和復(fù)蘇的原則：慢凍快融

　　當(dāng)細(xì)胞冷到零度以下，可以產(chǎn)生以下變化：細(xì)胞器脫水，細(xì)胞中可溶性物質(zhì)濃度升高，并在細(xì)胞內(nèi)形成冰晶。

　　如果緩慢冷凍，可使細(xì)胞逐步脫水，細(xì)胞內(nèi)不致產(chǎn)生大的冰晶;相反，結(jié)晶就大，大結(jié)晶會(huì)造成細(xì)胞膜、綱胞器的損傷和破裂。復(fù)蘇過(guò)程應(yīng)快融，目的是防止小冰晶形成大冰晶，即冰晶的重結(jié)晶。

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