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  M5076細(xì)胞小鼠卵巢網(wǎng)織細(xì)胞肉瘤細(xì)胞細(xì)胞凍存注意事項(xiàng):

  在細(xì)胞凍存時(shí)加入溫保護(hù)劑,能大大提高凍存效果。常用的低溫保護(hù)劑是DMSO,它是一種滲透性保護(hù)劑,可迅速透入細(xì)胞,提高胞膜對(duì)水的通透性,降低冰點(diǎn),延緩凍結(jié)過(guò)程,能使細(xì)胞內(nèi)水分在凍結(jié)前透出細(xì)胞外,在胞外形成冰晶,減少胞內(nèi)冰晶,從而減少冰晶對(duì)細(xì)胞的損傷。

  M5076細(xì)胞小鼠卵巢網(wǎng)織細(xì)胞肉瘤細(xì)胞細(xì)胞的凍存:

  1.先將凍存管放入 4℃冰箱,約 40min。

  2.接著置于-20℃冰箱,約30-60min。

  3.置于-80 *低溫冰箱中放置過(guò)夜。

  4.置于液氮罐中長(zhǎng)期保存。

  5 同時(shí)做好凍存記錄,在自己的筆記本和凍存記錄本上均要記錄。

  M5076細(xì)胞小鼠卵巢網(wǎng)織細(xì)胞肉瘤細(xì)胞的復(fù)蘇: 應(yīng)遵守慢凍快融的原則。

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  M5076細(xì)胞小鼠卵巢網(wǎng)織細(xì)胞肉瘤細(xì)胞細(xì)胞凍存和復(fù)蘇實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):

  1. 從增殖期到形成致密的單層細(xì)胞以前的培養(yǎng)細(xì)胞都可以用于凍存,但*好為對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞。在凍存前***好換一次培養(yǎng)液。

  2. 將凍存管放入液氮容器或從中取出時(shí),要做好防護(hù)工作,以免**。

  3. 凍存和復(fù)蘇*好用新配制的培養(yǎng)液。

  細(xì)胞凍存和復(fù)蘇的原則:慢凍快融

  當(dāng)細(xì)胞冷到零度以下,可以產(chǎn)生以下變化:細(xì)胞器脫水,細(xì)胞中可溶性物質(zhì)濃度升高,并在細(xì)胞內(nèi)形成冰晶。

  如果緩慢冷凍,可使細(xì)胞逐步脫水,細(xì)胞內(nèi)不致產(chǎn)生大的冰晶;相反,結(jié)晶就大,大結(jié)晶會(huì)造成細(xì)胞膜、綱胞器的損傷和破裂。復(fù)蘇過(guò)程應(yīng)快融,目的是防止小冰晶形成大冰晶,即冰晶的重結(jié)晶。

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