細(xì)胞舌癌 細(xì)胞舌癌: 完全培養(yǎng)基:DMEM高糖培養(yǎng)基90%;胎牛血清10%。 培養(yǎng)條件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
細(xì)胞舌癌 傳代方法: 收到細(xì)胞后,取出培養(yǎng)瓶在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況。 (一)如果細(xì)胞未長滿,用75%酒精噴灑整 個瓶消毒后放到*菌 臺內(nèi),嚴(yán)格無菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶,吸出培養(yǎng)液,僅留下 10ml培養(yǎng)液在瓶內(nèi)繼 續(xù)培養(yǎng)。 (二)如果細(xì)胞已長滿,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下: 1. 棄去培養(yǎng)液,用PBS(不含鈣,鎂離子)洗1-2次。 2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中, 倒轉(zhuǎn)放于37度培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱,然后又 將培養(yǎng)瓶倒轉(zhuǎn)大約30 秒后,在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓分 散,輕敲幾下培養(yǎng) 培養(yǎng)瓶,細(xì)胞隨即脫落下來。 3. 加入6-8ml完全培養(yǎng)基,吸出,分到新的培養(yǎng)瓶中。1:3~1:6 傳代;2~3天1次。
注意:傳代后一半用我們的培養(yǎng)基,一半用你們的,以免細(xì) 胞不適應(yīng)而造成生長不好。 凍存方法:凍存液:基礎(chǔ)培養(yǎng)基 +5%DMSO+20%FBS 儲存:液氮儲存
拜力提供ATCC 細(xì)胞|細(xì)胞系|細(xì)胞株|腫瘤細(xì)胞|細(xì)胞|貼壁 細(xì)胞|懸浮細(xì)胞|,細(xì)胞庫管理規(guī)范,提供的細(xì) 胞株背景清楚,提供 參考文獻(xiàn)和*優(yōu)培養(yǎng)條件。
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