CHO-K1細胞詳細介紹 CHO-K1細胞培養(yǎng)條件: 完全培養(yǎng)基:DMEM高糖培養(yǎng)基90%;胎牛血清10%。 培養(yǎng)條件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
CHO-K1細胞傳代方法: 收到細胞后,取出培養(yǎng)瓶在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況。 (一)如果細胞未長滿,用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到*菌 臺內,嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶,吸出培養(yǎng)液,僅留下 10ml培養(yǎng)液在瓶內繼續(xù)培養(yǎng)。 (二)如果細胞已長滿,即可進行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下: 1. 棄去培養(yǎng)液,用PBS(不含鈣,鎂離子)洗1-2次。 2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中, 倒轉放于37度培養(yǎng)箱1-3分鐘預熱,然后又將培養(yǎng)瓶倒轉大約30 秒后,在倒置顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓 分 散,輕敲幾下培養(yǎng)培養(yǎng)瓶,細胞隨即脫落下來。 3. 加入6-8ml完全培養(yǎng)基,吸出,分到新的培養(yǎng)瓶中。1:3~1:6 傳代;2~3天1次。
注意:傳代后一半用我們的培養(yǎng)基,一半用你們的,以免細 胞不適應而造成生長不好。 凍存方法:凍存液:基礎培養(yǎng)基 +5%DMSO+20%FBS 儲存:液氮儲存
拜力提供ATCC 細胞|細胞系|細胞株|腫瘤細胞|細胞|貼壁 細胞|懸浮細胞|,細胞庫管理規(guī)范,提供的細胞株背景清楚,提供 參考文獻和*優(yōu)培養(yǎng)條件。
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