關(guān)鍵詞:單克隆抗體制備服務(wù)|實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)
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單克隆抗體制備服務(wù)|實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)——pCzn1質(zhì)粒+Arctic Express宿主菌低溫表達(dá)體系。
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測(cè)序?qū)嶒?yàn)流程：
單克隆抗體用于臨床診斷和治療，目前研究較多的是抗人 T細(xì)胞單克隆抗體，用以識(shí)別人T細(xì)胞表面的不同抗原決定簇，有OKT系統(tǒng)及Leu系統(tǒng)。T細(xì)胞,特別是免疫調(diào)節(jié)T細(xì)胞(Ti/h及Tc/s細(xì)胞)對(duì)于調(diào)控免疫應(yīng)答和維持免疫自穩(wěn)起著至關(guān)重要的作用,臨床上許多疾病的發(fā)生與免疫調(diào)節(jié)失常有關(guān),因此，研究 T細(xì)胞在這些疾病中的變化，有助于探討病因和輔助診斷。
各種免疫缺損病、腫瘤或感染性疾病都與免疫功能低下有關(guān)，而變態(tài)反應(yīng)性疾病、自身免疫性疾病等與免疫功能亢進(jìn)有關(guān)。因此應(yīng)用 OKT系列單克隆抗體檢測(cè)這些疾病患者外周血中T細(xì)胞亞群及T4/T8比值的變化，對(duì)探討發(fā)病機(jī)理，及時(shí)診斷疾病及監(jiān)測(cè)病情發(fā)展有十分重要的意義。
接受腎移植或骨髓移植的患者往往需應(yīng)用各種免疫抑制劑以控制排斥反應(yīng)， T細(xì)胞亞群的檢測(cè)有助于了解移植器官的排異和發(fā)展?？谷薚細(xì)胞單克隆抗體可用以治療白血病、移植物抗宿主反應(yīng)(GVHD)和急性腎排斥等，目前尚處于摸索階段。
其原理是: B淋巴細(xì)胞能夠產(chǎn)生抗體， 但在體外不能進(jìn)行無限分裂; 而瘤細(xì)胞雖然可以在體外進(jìn)行無限傳代， 但不能產(chǎn)生抗體。將這兩種細(xì)胞融合后得到的雜交瘤細(xì)胞具有兩種親本細(xì)胞的特性。
一.提取合成專一性抗體的單個(gè)B淋巴細(xì)胞，但這種B淋巴細(xì)胞不能在體外生長(zhǎng)。
二.應(yīng)用細(xì)胞雜交技術(shù)使骨髓瘤細(xì)胞與B淋巴細(xì)胞融合，得到雜交瘤細(xì)胞。這種細(xì)胞既具有B淋巴細(xì)胞合成專一抗體的特性，也有骨髓瘤細(xì)胞能在體外培養(yǎng)增殖永存的特性
三.對(duì)雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)，選出所需要的細(xì)胞群，體外或體內(nèi)培養(yǎng)，從培養(yǎng)液或動(dòng)物腹水中提取單克隆抗體
單克隆抗體的提純
一般常用金黃色葡萄球菌蛋白A-瓊脂糖4B親和層析法。
單克隆抗體的保存 由腹水中獲得的抗體,經(jīng)離心去除細(xì)胞成分，再經(jīng)冷凍超速離心,取上清液加0.1%NaN3，少量分裝，冷凍于-70℃可保存幾年。 但應(yīng)避免反復(fù)凍融,否則抗體失活，特別是IgM抗體。提純的單克隆抗體,冷凍干燥保存于2~8℃，取出時(shí)溶解后，保存于2~8℃，至少一個(gè)月內(nèi)可保持穩(wěn)定。腹水抗體也可冷凍干燥低溫(4℃)保存兩年，融化后放置4℃下保存一個(gè)月。短期使用的腹水抗體，4℃3~4 個(gè)月仍保持穩(wěn)定, 培養(yǎng)上清加0.1%NaN3，貯于-20℃，兩年不失活性。
特點(diǎn):
一是特異性，針對(duì)特定的單一抗原表位，它具有高度的特異性，抗腫瘤抗體藥物的研究表明，其特異性主要表現(xiàn)為特異性結(jié)合、選擇性殺傷靶細(xì)胞、體內(nèi)靶向性分布以及具有更強(qiáng)的療效。
二是多樣性，主要表現(xiàn)在靶抗原的多樣性、抗體結(jié)構(gòu)的多樣性、作用機(jī)制的多樣性等方面。
三是定向性，抗體藥物可以定向制造，就是根據(jù)需要制備具有不同治療作用的抗體藥物。