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【CD81】FCM，流式抗體，超過(guò)科研的質(zhì)檢 西班牙Immunostep
【CD81】FCM，流式抗體，超過(guò)科研的質(zhì)檢 西班牙Immunostep公司簡(jiǎn)介
IMMUNOSTEP是一家擁有混合業(yè)務(wù)模式的公司，一方面開(kāi)發(fā)，制造和銷(xiāo)售用于根據(jù)合同執(zhí)行的研究和診斷以及其他開(kāi)發(fā)服務(wù)的產(chǎn)品。
關(guān)于產(chǎn)品，該公司專(zhuān)注于流式細(xì)胞術(shù)中使用的試劑，試劑盒和設(shè)備的開(kāi)發(fā)和商業(yè)化。這些產(chǎn)品用于研究和診斷。
公司在研發(fā)領(lǐng)域擁有非常接近市場(chǎng)的“管道”，解決了診斷領(lǐng)域的醫(yī)療需求，并獲得10項(xiàng)國(guó)際**的支持。
為加強(qiáng)我們對(duì)提供高質(zhì)量產(chǎn)品的承諾，IMMUNOSTEP正在通過(guò)ISO 9001：2008和ISO 13845：2012認(rèn)證的質(zhì)量管理體系，該體系符合醫(yī)療器械和試劑制造的國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)。
IMMUNOSTEP成立于2001年，位于薩拉曼卡（西班牙），薩拉曼卡大學(xué)科學(xué)園，西班牙歷史*悠久的大學(xué)，也是連續(xù)運(yùn)營(yíng)的第三古老的歐洲大學(xué)，在流量診斷服務(wù)和臨床研究Cytometry全球認(rèn)可。
【CD81】FCM，流式抗體，超過(guò)科研的質(zhì)檢 西班牙Immunostep
【CD81】FCM，流式抗體，超過(guò)科研的質(zhì)檢 西班牙Immunostep
【CD81】FCM，流式抗體，超過(guò)科研的質(zhì)檢 西班牙Immunostep
流式抗體（熒光抗體）細(xì)胞染色步驟
染色緩沖液 （BSA）的配制： PBS含有1% FBS和0.09% NaN3，置于冰上或4度冰箱備用。
準(zhǔn)備單細(xì)胞懸液：淋巴組織、骨髓、血液或培養(yǎng)的細(xì)胞。
用 冰染色緩沖液 洗細(xì)胞2次，離心細(xì)胞，用冰染色緩沖液重懸細(xì)胞，使終濃度為2×10 7 細(xì)胞/ml。
各取50ul（10 6 細(xì)胞）細(xì)胞懸液到2個(gè)圓底的Ep管中。
根據(jù)抗體說(shuō)明書(shū)在其中1個(gè)Ep管中加入合適的抗體量，另外1個(gè)加入同型對(duì)照抗體，冰上避光孵育20分鐘（建議每5分鐘輕輕混勻，以免細(xì)胞沉積）。根據(jù)熒光抗體的親和力適當(dāng)延長(zhǎng)染色時(shí)間。
用1ml染色緩沖液洗2次去除未結(jié)合的抗體，300×g離心5分鐘，每次離心后小心吸取上清。
用適量染色緩沖液（如500ul）重懸細(xì)胞。
流式細(xì)胞儀分析染色結(jié)果（不超過(guò)4小時(shí)）。如果暫時(shí)無(wú)法檢測(cè)，也可以將染色后的細(xì)胞用4%多聚甲醛固定后，避光儲(chǔ)存在4度。固定后的細(xì)胞可以保存*多一個(gè)星期。
【CD81】FCM，流式抗體，超過(guò)科研的質(zhì)檢 西班牙Immunostep
流式抗體CD45R中的R表示什么意思
通常抗體說(shuō)明書(shū)上寫(xiě)的是：每百萬(wàn)個(gè)細(xì)胞加_____微升抗體，就是一個(gè)test， 仔細(xì)看說(shuō)明書(shū)，寫(xiě)得很詳細(xì)（至少BD ebioscience IMMUNOSTEP說(shuō)明書(shū)都很詳細(xì)，別的不清楚）你的25test就是按照這個(gè)標(biāo)準(zhǔn)算可以做25個(gè)樣
【CD81】FCM，流式抗體，超過(guò)科研的質(zhì)檢 西班牙Immunostep
流式操作步驟：表面抗體染色
全血樣本：
1、取一定體積的抗凝全血，（人100ul，小鼠取30~50ul）
2、加入適量的表面抗體，室溫孵育15min （抗體用量和孵育條件詳見(jiàn)抗體說(shuō)明書(shū)）
3、按使用的溶血素說(shuō)明裂解紅細(xì)胞后，加入1~2ml 流式染色緩沖液洗一次
4、300g離心5min 棄上清，用500ul流式染色緩沖液重懸
5、立即上機(jī)，如不能立即檢測(cè)，用0.5ml 0.1~4%多聚甲醛重懸，避光4℃保存24小時(shí)內(nèi)上機(jī)分析
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