關(guān)鍵詞:細(xì)胞培養(yǎng)服務(wù)|實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)
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細(xì)胞培養(yǎng)服務(wù)|實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)——pCzn1質(zhì)粒+Arctic Express宿主菌低溫表達(dá)體系。
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測(cè)序?qū)嶒?yàn)流程：
生存期
在細(xì)胞一代中，細(xì)胞能倍增3～6次，經(jīng)歷三個(gè)階段：
1. 潛伏期(latent phase) ：
接種 經(jīng)過 懸浮期(細(xì)胞質(zhì)回縮,胞體呈圓球形) 貼壁。
初代培養(yǎng)細(xì)胞 經(jīng)過 10～24小時(shí)或更多時(shí)間。
連續(xù)細(xì)胞系和癌細(xì)胞系 經(jīng)過 10～30分鐘 貼附。
貼附現(xiàn)象是一個(gè)非常復(fù)雜和受多種因素的影響。
影響細(xì)胞貼附：底物表面不干凈，影響細(xì)胞貼附。
利于細(xì)胞貼附：底物表面帶有陽性物質(zhì)與特殊物質(zhì):
纖粘連蛋白(fibronectin FN)、
細(xì)胞表面蛋白(cell surface proteinCSP)
這些物質(zhì)有的存在與細(xì)胞表面,有的來自血清。
潛伏期特點(diǎn)：
長(zhǎng)短與細(xì)胞接種密度、種類、使用的培養(yǎng)基性質(zhì)有關(guān)。
(1)細(xì)胞貼附后進(jìn)入潛伏期,細(xì)胞無增殖。少見分裂相，細(xì)胞有運(yùn)動(dòng)活動(dòng)。
(2)初代培養(yǎng) 細(xì)胞潛伏期約為24～96小時(shí)或更長(zhǎng)，
連續(xù)細(xì)胞系和腫瘤細(xì)胞潛伏期約6～24小時(shí)。
(3)細(xì)胞接種密度大潛伏期短。
(4)細(xì)胞出現(xiàn)分裂相增多時(shí)，標(biāo)志細(xì)胞進(jìn)入指數(shù)增生期。
實(shí)驗(yàn)用品 
1. 種類︰ 
1.1. 細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)用品均為無菌，除了玻璃容器與pasteur pipet 外，其它均為塑料無菌 
制品。 
1.2. TC 級(jí)培養(yǎng)盤表面均有coating 高分子物質(zhì)以讓細(xì)胞吸附，培養(yǎng)容器種類有Tflask, 
plates, dishes, roller bottle 等，依實(shí)驗(yàn)需要使用。 
1.3. plastic sterile pipet: 1 ml, 2 ml,5 ml, 10 ml, 25 ml 
1.4. 塑料離心管: 15 ml, 50 ml，均有2 種不同材質(zhì)，其中polypropylene (PP) 為不透 
明材質(zhì)，polystyrene (PS) 為透明材質(zhì)，可依實(shí)驗(yàn)需要而選擇適合材質(zhì)之離心管。 
1.5. glass pastuer pipet: 9 inch，用以抽掉廢棄培養(yǎng)液等。 
1.6. 玻璃血清瓶(Pyrex or Duran glassware)：100 ml, 250 ml,500 ml,1000 ml 
2. 清洗︰ 
2.1. 新購玻璃血清瓶先以0.1~0.05 N HCl 浸泡數(shù)小時(shí)，洗凈后才開始使用。 
2.2. 用過之玻璃血清瓶，以高壓蒸汽滅菌，洗凈后分別用一次與二次去離子水沖洗干 
凈，勿加清潔劑清洗。 
3. 滅菌︰ 
3.1. 實(shí)驗(yàn)用玻璃血清瓶以鋁箔紙包覆瓶蓋，高壓蒸汽滅菌121 oC, 15 lb, 20 分鐘，置于 
oven 中烘干。 
3.2. 實(shí)驗(yàn)用玻璃pasteur pipet 以干熱滅菌170 oC, 4 小時(shí)。 
3.3. 液體或是固體廢棄物可用10 % hypochloride 溶液(次氯酸，即漂白水) 或是蒸汽高 
壓滅菌121 oC, 15 lb, 20 分鐘處理。