關(guān)鍵詞:單克隆抗體定制技術(shù)服務(wù)|實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)
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單克隆抗體定制技術(shù)服務(wù)|實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)——pCzn1質(zhì)粒+Arctic Express宿主菌低溫表達(dá)體系。
我們具備豐富的蛋白表達(dá)設(shè)計(jì)經(jīng)驗(yàn)及實(shí)驗(yàn)操作技巧，承諾客戶不成功不收費(fèi)。在獲得重組蛋白產(chǎn)品的同時(shí)，我們也會(huì)提供相應(yīng)的原始數(shù)據(jù)和原始圖片,不需要再額外花費(fèi)精力重復(fù)實(shí)驗(yàn)。另一方面，我們所有的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)真實(shí)可信，我們提供原始的表達(dá)菌株和克隆質(zhì)粒，客戶可以依據(jù)我們的實(shí)驗(yàn)報(bào)告重復(fù)我們的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
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測(cè)序?qū)嶒?yàn)流程：
動(dòng)物脾臟有上百萬種不同的B淋巴細(xì)胞系，重排后具有不同基因不同的B淋巴細(xì)胞合成不同的抗體。當(dāng)機(jī)體受抗原刺激時(shí)，抗原分子上的許多決定簇分別激活各個(gè)具有不同基因的B細(xì)胞。應(yīng)用淋巴細(xì)胞雜交瘤技術(shù)將免疫動(dòng)物的B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合形成雜交瘤細(xì)胞，通過HAT篩選，ELISA抗體檢測(cè)，有限稀釋克隆化，選擇出具有分泌抗體功能又能無限繁殖的來源于單一B細(xì)胞的雜交瘤細(xì)胞。該細(xì)胞分泌產(chǎn)生非常均一的、其結(jié)構(gòu)、氨基酸順序都是一致的，且只針對(duì)一種抗原決定簇的高特異性抗體，這就是單克隆抗體。
單抗的*大優(yōu)勢(shì)是它的特異性、均一性、高效性和無限供應(yīng)性。在免疫學(xué)、醫(yī)學(xué)、生物學(xué)等領(lǐng)域的基礎(chǔ)研究和臨床醫(yī)學(xué)上，包括對(duì)疾病(包括癌癥)的診斷、預(yù)防和治療等方面，均顯示出巨大的生命力。
服務(wù)編號(hào) 服務(wù)內(nèi)容 服務(wù)標(biāo)準(zhǔn) 周期 價(jià)格
YKSM-001 蛋白單抗 1.2-5株雜交瘤細(xì)胞株；
2.每株細(xì)胞提供2-5mg抗體；
3.抗體ELISA≥80,000； 18-24 周 詢價(jià)
YKSM-002 多肽單抗 1.2-5株雜交瘤細(xì)胞株；
2.每株細(xì)胞提供2-5mg抗體；
3.抗體ELISA≥80,000； 20-26 周 詢價(jià)
YKSM-003 磷酸化多肽單抗 1.2-5株雜交瘤細(xì)胞株；
2.每株細(xì)胞提供2-5 mg抗體；
3.磷酸化多肽抗體ELISA效價(jià)大于80，000；
4.磷酸化多肽與非磷酸化多肽效價(jià)區(qū)分大于16倍（ELISA、Dot Blot） 20-26 周 詢價(jià)
YKSM-004 小分子化合物單抗 1.1-3株雜交瘤細(xì)胞株；
2.每株細(xì)胞提供2-5 mg抗體；
3.抗體針對(duì)小分子偶聯(lián)物Elisa效價(jià)大于80000,同時(shí)抗體與小分子偶聯(lián)物的結(jié)合能夠被小分子化合物特異性的競(jìng)爭(zhēng)抑制 20-26 周 詢價(jià)
YKSM-005 蛋白檢測(cè)配對(duì)單抗 1.2-5株雜交瘤細(xì)胞株；
2.1對(duì)ELISA配對(duì)檢測(cè)抗原的抗體，包被抗體和標(biāo)記抗體各5 mg 22-30 周 詢價(jià)
階段一
通過免疫接種程序，免疫5只 Balb/c小鼠。用ELISA測(cè)定血清滴度。大約需要3-4mg 蛋白抗原或2mg偶聯(lián)多肽抗原和0.5mg未偶聯(lián)多肽。當(dāng)血清中抗體滴度達(dá)到合適值，利用小鼠脾細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行融合，以生成需要的雜交瘤,對(duì)雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行ELISA，從中篩選出陽性的母克隆細(xì)胞株。
階段二
對(duì)ELISA檢測(cè)陽性的雜交瘤做有限稀釋，對(duì)亞克隆細(xì)胞做ELISA檢測(cè)，篩選出5個(gè)適合做ELISA檢測(cè)的單克隆抗體雜交瘤細(xì)胞株。對(duì)篩選出的雜交瘤中的單克隆抗體進(jìn)行亞類鑒定。
選項(xiàng)一
從母克隆雜交瘤中篩選出WESTERN BLOTTING陽性的細(xì)胞株，做有限稀釋，從中再篩選出WESTERN BLOTTING結(jié)果強(qiáng)陽性的亞克隆細(xì)胞株。
選項(xiàng)二
對(duì)上述ELISA和WESTERN BLOT檢測(cè)確定的陽性雜交瘤做Immunocytochemistry檢測(cè)，篩選出適合做ICC檢測(cè)的雜交瘤細(xì)胞株 。
選項(xiàng)三
從階段二中篩選出的雜交瘤中，做Immunohistochemistry檢測(cè)，從中篩選出適合做IHC的雜交瘤細(xì)胞株。
選項(xiàng)四
從階段二中篩選出的雜交瘤中，做Flow cytometry檢測(cè)，從中篩選出適合做Flow cytometry的雜交瘤細(xì)胞株。
選項(xiàng)五
從融合的母克隆ELISA陽性的細(xì)胞中，用天然蛋白做Immunoprecipitation檢測(cè)，從中篩選出能產(chǎn)生和天然結(jié)構(gòu)蛋白結(jié)合的單克隆抗體。對(duì)抗體親和力進(jìn)行測(cè)定。
選項(xiàng)六
通過腹水或高密度無血清培養(yǎng)大量生產(chǎn)單克隆抗體。
選項(xiàng)七
用A蛋白或G蛋白純化抗體。
選項(xiàng)八
將純化的抗體偶聯(lián)到層析拄上，做天然蛋白通過抗體偶聯(lián)層析柱回收效率檢測(cè)，篩選出能用來純化目的蛋白的雜交瘤細(xì)胞株。
附加選項(xiàng)
抗體生物素偶聯(lián)
多肽合成與KLH偶聯(lián)多肽