關鍵詞:454(GS FLX系統(tǒng))超高通量測序服務|實驗技術服務
簡介：世界****454(GS FLX系統(tǒng))超高通量測序服務|實驗技術服務原裝**，質量保證,價格優(yōu)惠。
454(GS FLX系統(tǒng))超高通量測序服務|實驗技術服務——pCzn1質粒+Arctic Express宿主菌低溫表達體系。
我們具備豐富的蛋白表達設計經驗及實驗操作技巧，承諾客戶不成功不收費。在獲得重組蛋白產品的同時，我們也會提供相應的原始數(shù)據和原始圖片,不需要再額外花費精力重復實驗。另一方面，我們所有的實驗數(shù)據真實可信，我們提供原始的表達菌株和克隆質粒，客戶可以依據我們的實驗報告重復我們的實驗結果。
產品品牌：454(GS FLX系統(tǒng))超高通量測序服務|實驗技術服務   http://handsem.com/goodsid/fenleiyi/2868603/1.html
實驗描述               
測序實驗流程：
1、文庫制備：根據樣品的種類和實驗目的，將基因組DNA/cDNA段化處理至400-800bp間，經末端修復與特異性接頭連接等修飾后變性處理回收單鏈的DNA（sstDNA）；
Roche <wbr>454（GS <wbr>FLX <wbr>Titanium <wbr>System）超高通量測序技
2、Emulsion  PCR：特定比例的單鏈DNA文庫被固定在特別設計的DNA捕獲磁珠上，使大部分磁珠磁珠攜帶了一個獨特的單鏈DNA斷。磁珠結合的文庫被擴增試劑乳化，形成油包水的混合物，每個獨特的片斷在自己的微反應器里進行獨立的擴增，而不受其他的競爭性或者污染性序列的影響。整個片段文庫的擴增平行進行。擴增后產生了幾百萬個相同的拷貝。隨后，乳液混合物被打破，擴增后仍結合在磁珠上的段既可被回收純化用于后續(xù)的測序實驗；
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3、測序反應：攜帶DNA的珠子與其他反應物混合物，隨后放入PTP板中進行后繼的測序。PTP孔的直徑（29um）只能容納一個珠子（20um）。然后將PTP板放置在GS FLX中，測序開始。每一個與模板鏈互補的核苷酸的添加都會產生化學發(fā)光的信號，并被CCD照相機所捕獲；
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4、數(shù)據分析：GS FLX系統(tǒng)在10小時的運行當中可獲得100多萬個讀長，讀取超過4-6億個堿基信息，通過GS FLX系統(tǒng)提供兩種不同的生物信息學工具對測序數(shù)據進行分析。
技術特點：
? 速度快，一個測序反應耗時10個小時，獲得4-6億(400-600M)個堿基對。比傳統(tǒng)的Sanger測序的方法快100倍；
? 讀長長，單個序列的讀長更長，平均可達到450個堿基左右；
? 通量高，每個反應可以得到超過100萬個序列讀長，成本大大降低；
? 準確度高，讀長超過400bp時，單一讀長的準確性可以超過99%；
? 一致性好，測序結果一致性超過99.99%；
? 可以進行Pair－End測序研究；
? 簡便高效，不需要進行建庫、克隆挑取、質粒提取等工作，一個人可以在**內完成一個微生物物種的測序工作。
GS FLX系統(tǒng)的應用
全基因組測序
多達120 Mb的未知基因組的測序
－生成基因組結構概圖
－研究DNA序列的組織，分布和信息
－基因篩查：尋找新基因，定位和功能
－和其他基因組進行比較研究
全基因組進行測序，例如微生物基因，BAC和YAC克隆測序。
比較基因組研究
－識別單堿基突變
－識別突變熱點和保守區(qū)域
－識別插入或者缺失的基因
－斷定基因型和表型之間的相關關系（比如，研究藥物抗性的遺傳基礎）
－ 基于基因測序變化進行毒性預測
－進行流行病學分析
－了解工業(yè)生產菌株和它們的親代菌株序列上的差異作為進行工業(yè)生產菌株開發(fā)的遺傳基礎
－進行宏基因組 （metagenomics）研究
－古代化石DNA 測序研究
利用配對末端方法（Pair-End Tag）將Contigs拼接成Scaffolds。
轉錄組和基因調節(jié)研究
基于短Tags，ESTs, ChIP，或者GIS-PET序列的高通量轉錄組分析，或者miRNA 序列的基因組范圍識別，小分子和非編碼RNA的測序。
研究DNA的甲基化模式來進行基因調節(jié)的研究。
擴增產物分析
PCR產物的超精細測序（應用于醫(yī)學研究的重測序）
－在混合的腫瘤樣本中識別體細胞突變
－在群體水平上發(fā)現(xiàn)高可信度的SNP位點